Yotsuba kann am besten als chirpy, fröhlich und voller Neugier beschrieben werden, da sie alle Geheimnisse ihrer Brüder kennenlernen möchte. Diese kleine Detektivin ist niemals irgendwo ohne ihre Lupe, da sie immer die Dinge überprüft. Ihre Unterschrift "checki" taucht immer dann auf, wenn sie etwas sehr Interessantes untersucht. Yotsuba kommt aus England und ist eine der drei neuen Schwestern, die 2000 zum ersten Mal in der Zeitschrift Dengeki Gs und im ersten Spiel von Sister Princess auftrat. In Schwester Prinzessin RePure spricht sie einen interessanten Punkt darüber an, wie viel sie alle wirklich über ihren Bruder wissen. Sie arbeitet mit Rinrin zusammen, um mehr über ihn herauszufinden, und möchte wie der Rest ihrer Schwestern ihm näher kommen.