Tsunade ist die Enkelin des Ersten Hokage. Sie ist eine der legendären Sannin. Nach seiner gescheiterten Invasion in Konoha nähert sich Orochimaru Tsunade, um sie dazu zu bringen, seine Arme zu heilen. Während sie sich zunächst weigert, bietet Orochimaru an, Dan und Nawaki wiederzubeleben, um seine Arme zu heilen. Tsunade ist fasziniert und hat eine Woche Zeit, um über die Angelegenheit nachzudenken. Sobald Tsunade Uzumaki Naruto getroffen hat, beginnt sie sich an die Träume ihrer beiden Lieben zu erinnern und wie sehr sie das Dorf Konoha liebten. Während sie sich danach sehnt, beide wiederzusehen, kann Tsunade sich letztendlich nicht dazu bringen, Orochimaru zu helfen. Seine Hoffnungen, Konoha zu zerstören, sind zu stark, um sie zu ignorieren. Tsunade ist entschlossen, das Dorf zu beschützen, das ihre Lieben bis zum Ende ihres Lebens geliebt haben. Er kämpft mit Orochimaru und besiegt ihn schließlich. Nachdem Tsunade den Titel des fünften Hokage angenommen hat, kehrt er anschließend nach Konoha zurück. Seit Tsunade Hokage geworden ist, fungiert er in erster Linie als Quelle für Aufträge und mobilisiert Konohas-Streitkräfte, wenn dies erforderlich ist. Darüber hinaus spielt Tsunade eine große Rolle bei der Heilung der schwereren Verletzungen, die bei denjenigen auftreten, die sie auf Mission schickt. Am Ende von Teil I wird Haruno Sakura Tsunades-Lehrling. Tsunades Markenzeichen ist ihre unmenschliche Stärke, die sich aus ihrer hervorragenden Chakra-Kontrolle ergibt. Indem sie das Chakra speichert und es am Kontaktpunkt freigibt, kann sie ihre Kraft so weit steigern, dass sie mit bloßen Händen Felsbrocken durchbrechen kann. Sie ist auch eine äußerst talentierte Medical-nin und kann Wunden heilen, die die meisten anderen für unmöglich halten würden. Aufgrund ihrer Chakra-Kontrolle und ihrer medizinischen Fähigkeiten hat Tsunade eine Form der Regeneration geschaffen. Sie ist also wirklich fast 50 Jahre alt, sieht aber so aus, als wäre sie in den Zwanzigern.